(1)方針微生物的品種 不同品種的微生物在細(xì)胞構(gòu)造、生理特性、體內(nèi)代謝等方面存在著差異，有的差異較大，如細(xì)菌和真菌之間，前者歸于原核生物，后者歸于真核生物，前者細(xì)胞壁的主要成分為肽聚糖，后者的細(xì)胞壁主要由幾丁質(zhì)構(gòu)成等。有的差異較小 如同一個(gè)屬的各類菌。由于有這樣那樣的差異，所以各種微生物對滅菌劑作出的反響也不盡相同：
①細(xì)胞壁成分的差別影響著滅菌劑進(jìn)人細(xì)胞的難易；
②原生質(zhì)膜結(jié)構(gòu)的差異造成了膜對物質(zhì)通透性的差異，對滅菌劑能否順利觸摸作用部位有著重大的影響；
③微生物細(xì)胞內(nèi)的代謝途徑中是否存在著受滅菌劑進(jìn)犯的作用點(diǎn)，這個(gè)作用點(diǎn)對'這種微生物又是不是“致命”的，關(guān)系到滅菌作用的有無和巨細(xì)；
④有些品種的微生物具有分化滅菌劑尤其是有機(jī)滅菌劑的身手，使滅菌劑失效；
⑤有些微生物還會(huì)對某些滅菌劑發(fā)生抗藥性。
(2)微生物的開始污染量 研討證明，當(dāng)資料或產(chǎn)品污染微生物數(shù)量特別大時(shí)，本來作用表現(xiàn)得很好的滅菌劑也常常失掉其維護(hù)作用，原因可能是：
①當(dāng)微生物很多繁衍時(shí)，會(huì)分泌出一些維護(hù)性的物質(zhì)，把菌體包裹起來，使滅菌劑不能與之觸摸，因而起不到應(yīng)有的作用，如微生物分泌的蛋白質(zhì)維護(hù)層使季銨化合物、尼泊金酯、酚醛、含汞制劑失掉滅菌活性；
②很多的微生物在被殺死時(shí)耗費(fèi)了很多的滅菌劑并使之降至有用滅菌濃度以下，使殘存的菌又很快繁衍起來。有人在研討抗壞血酸對生胞梭菌(、C. sporogenes)的芽胞滅菌作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，若用0.2% 抗壞血酸，在75℃處理60min，每毫升10 (2)芽胞時(shí)，滅菌率為99%， 而每毫升10(6)個(gè)芽胞時(shí)，滅菌率僅為37%。